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油红O还是尼罗红?脂质染色工具知多少

发布者:开元(SPORTS)体育在线登录 科技    发布时间:2021-08-18     
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在病理检验中,脂类染色法最常用于证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂滴(Lipid Droplet)是中性脂(主要有脂酰甘油和酯化胆固醇)的主要贮存场所,是脂肪细胞的主要成分,占据脂肪细胞的大部分空间。正常情况下,除脂肪细胞以外的其他细胞内一般不见或仅能看到微量脂滴。但病理情况下,这些细胞中可能出现脂滴或者脂滴明显增多,通过脂肪染色能将这些脂滴清晰的显现出来。比如,心、肝、肾等实质器官发生脂肪变性,胞浆内出现大小不一的空泡,可用脂肪染色来区分是脂肪变性还是水性变性或糖原贮存等。

 

脂类染色法.jpg

 

目前脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等,这种脂肪染色方法,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色的过程,经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好,根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)会对组织切片产生较好的染色效果。

 

用苏丹染料进行脂类染色,多用用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油明胶和阿拉伯糖胶等,在免疫组化研究中应用较多。

 

苏丹染料主要针对于组织切片的脂质染色,同时灵敏度也较低,且存在操作过程中试剂挥发过多,易形成背景沉淀,无法兼容活细胞等局限。

 

油红O染色小鼠肝脏结果.jpg

油红O染色小鼠肝脏结果

 

鉴于脂质化学染料有上述诸多弊端,今天给大家带来几款优秀的脂质荧光染料:

 

尼罗红(Nile Red)(货号:22190),尼罗红是一种亲脂性荧光染色剂,它是一类环境敏感性荧光染料,能够在富含脂质的环境中产生强烈的荧光,而在水性介质中的荧光强度极小,这种特性使得它成为了一款极重要检测细胞内脂滴的荧光指示剂,可以通过荧光显微镜和流式细胞检测结果。

 

Nile Red的结构式.png

Nile Red的结构式

 

除了广泛使用的尼罗红,今天还给大家带来了荧光染料领航者AAT Bioquest自研的升级版脂质染色工具: Nile Green(货号:22730)和Droplite Red(货号:22735), 跟尼罗红性质类似,它们也是在富含脂质的环境中具有强烈荧光的,而在水性介质中具有最小的荧光。可用荧光显微镜,流式细胞术或荧光微孔板阅读器检测细胞内脂液滴,是一类优异的活细胞脂质染料。 其中Nile Green仅染色细胞内脂液滴,具有绿色荧光,它可以与其他荧光染料一起使用,用于多重染色,弥补了尼罗红染色的缺陷。

 

染色结果赏析:

 

MPCCs中糖诱导的中性脂质积累.jpg

处理10天后,MPCCs中糖诱导的中性脂质积累:
引文Long-term exposure to abnormal glucose levels alters drug metabolism pathways and insulin sensitivity in primary human hepatocytes by Davidson et al., Scientific Reports, June 2016.

尼罗红染色IAA处理的褐藻.jpg

尼罗红染色IAA处理的褐藻(黄色是叶绿体,红色是脂滴):
引文:Indole-3-acetic-acid-induced phenotypic plasticity in Desmodesmus algae by Chung et al., Scientific Reports, July 2018.

油酸处理的 HeLa 细胞脂滴染色.jpg

油酸处理的 HeLa 细胞脂滴染色(货号:22730

油酸处理的 HeLa 细胞(右)脂滴染色.jpg

油酸处理的 HeLa 细胞(右)脂滴染色(货号:22735

 

产品推荐:

产品名称货号Ex/Em
Nile Red *CAS 7385-67-3*22190559nm/635nm
Cell Navigator Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit22730485nm/520nm
Cell Navigator Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit22735550nm/640nm
脂肪变性比色分析试剂盒(油红O)10012643 

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